细菌培养法的实验原理
是相乘的方法的微生物,让他们在预定的再现培养基控制的实验室条件下。微生物培养是用作分子生物学研究工具的基础和基本诊断方法。
细菌培养物可以在具有一层薄薄的琼脂培养基的培养皿中生长。一旦培养皿中的生长培养基接种了所需的细菌,将培养皿在选定细菌生长的最佳温度(例如,通常在 37 摄氏度或人体温度下,用于人类培养)或动物,或较低的环境文化)。
达到所需的生长水平后,琼脂平板可以倒置存放在冰箱中较长时间,以保留细菌以供将来实验使用。
在将琼脂倒入盘中并使其凝固之前,可以将多种添加剂添加到琼脂中。某些类型的细菌只能在某些添加剂存在的情况下才能生长。这也可以用于创建包含抗生素抗性基因的工程细菌菌株。
当将所选抗生素添加到琼脂中时,只有允许赋予耐药性的基因插入物的细菌细胞能够生长。这允许研究人员仅选择成功转化的菌落。
培养条件
培养时应根据细菌种类和目的等选择培养方法、培养基,制定培养条件(温度、pH值、时间,对氧的需求与否等)。一般操作步骤为先将标本接种于固体培养基上,做分离培养。再进一步对所得单个菌落进行形态、生化及血清学反应鉴定。
培养基常用牛肉汤、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖、血液等和某些细菌所需的特殊物质配制成液体、半固体、固体等。
一般细菌可在有氧条件下,37℃中放18~24小时生长。厌氧菌则需在无氧环境中放2~3天后生长。个别细菌如结核菌要培养1个月之久。