比较pcr技术和dna分子杂交技术的异同
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2015-11-11
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DNA复制是指DNA双链在细胞分裂以前进行的复制过程,复制的结果是一条双链变成两条一样的双链(如果复制过程正常的话),每条双链都与原来的双链一样DNA分子首先解开双链以DNA的一条链为模板按照碱基互补配对原则合成RNA的过程以mRNA为模板,以tRNA为运载工具.合成具有一定氨基酸顺序的蛋白质的过程K|S|5UPCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。场所细胞核、线粒体、叶绿体细胞核、线粒体、叶绿体K|S|5U细胞质(核糖体)K|S|5U体外原料4种游离脱氧核苷酸4种游离核糖核苷酸K|S|5U20种游离氨基酸K|S|5U4种游离脱氧核苷酸模板DNA分子中的两条链DNA中的一条链K|S|5UmRNA K|S|5U目的基因(或目的基因的两条链)酶解旋酶、DNA聚合酶等(DNA连接酶)K|S|5U(解旋酶、RNA聚合酶等不要求氨基酰tRNA合成酶、氨肽酶等K|S|5U耐热DNA聚合酶(Taq酶)能量ATPATPATP不需要ATP,能量来自外界加热过程1、解旋:在解旋酶作用下,利用ATP释放的能量解开双螺旋;2、在DNA聚合酶的作用下,按照碱基互补配对原则,把游离的脱氧核苷酸连接到模板链上,并使脱氧核苷酸之间过磷酸二酯键连接;3、沿着模板链不断延伸,最终形成两个一模一样的DNA分子。1、解旋:在解旋酶作用下,利用ATP释放的能量解开双螺旋;2、以解开的一条DNA链为模板,按碱基互补配对原则,游离的核糖核苷酸与脱氧核苷酸配对,3、核糖核苷酸间通过磷酸二酯键连接成RNA(mRNA,tRNA,rRNA )mRNA从核孔进入细胞质,与核糖体结合,从起始密码子(AUG)开始翻译。tRNA一端携带氨基酸进入核糖体.另一端的反密码子与mRNA上的密码子配对,两氨基酸间形成肽键。核糖体继续沿mRNA 移动,每次移动一个密码子,至终止密码结束,肽链形成1、变性:即加热至高温使得目的基因的双链打开(解旋,但不需要解旋酶);2、退火 (复性):降温使得解开的两条链分别与引物结合;3、延伸:在Taq酶的作用下,按碱基互补配对原则,脱氧核苷酸之间过磷酸二酯键连接成新链。重复上述三步,就能获得大量的目的基因。模板去向复制后,模板链与新形成的子链形成双螺旋结构转录后,模板链与非模板链重新形成双螺旋结构分解成核
崔翠玲
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