Question

GB/T 4789.2-2008 食品卫生微生物学检验.菌落总数测定

新手上路,这个实验完全不会做,现在必须学会这个实验,
有哪位好心的朋友可以告诉我这个检验方法要提前准备购买哪些试剂?做哪些准备?
详细的操作步骤(通俗易懂一点的),太书面不理解.设备有现成的.....大侠帮帮忙!!!

Answer 1

所用物品试剂：PCA平板计数琼脂：称取23.5g加1000ml分装三角瓶里，121℃灭菌20min
无菌生理盐水：氯化钠8.5g加1000ml蒸馏水121℃灭菌20min（理论上15min即可，但实际不比理论）（分析纯的氯化钠）
1ml 移液管7支 10ml一支 洗耳球一个（所用物品用前121℃灭菌20min）四支试管 试管架一个
250ml三角瓶5个 500ml三角瓶2个 量筒
75%酒精一瓶，酒精灯一盏，平皿9个（用前121℃灭菌20min）
步骤：PCA配好装250ml三角瓶，氯化钠配好装500ml三角瓶，四支试管包好，平皿包好，移液管包好，洗耳球包好，剪刀一把包好，121℃灭菌20min
同时打开超净台灭菌！灭完菌后，在超净台里进行无菌操作（操作前要注意关紫外灯避免被其灼伤），点燃酒精灯，双手酒精消毒（注意别把自己烧着了），样品用剪刀剪碎，倒入装有225ml无菌生理盐水的三角瓶中摇匀，用10ml移液管移取9ml无菌生理盐水分别至四支试管，然后再用1ml移液管移取摇好的样液至第一支试管，摇匀，然后再用第二只移液管移取第一支试管里的样液至第二支试管，摇匀，然后再用第三支移液管移取第二支试管里的样液至第三支试管，摇匀！（这就是梯度稀释步骤）弄好以后依次在每个试管里各用1ml移液管移取1ml摇匀样液至三个平皿里！另用1ml移液管移取1ml生理盐水至第四个平皿里！接着就把灭好的PCA培养基（50℃左右不烫手为宜）分别倒入四个平皿里，每个10ml左右，自己感觉，以上操作均在酒精灯旁完成，以上操作均为无菌操作！倒完后，放入恒温培养箱，36℃加减1°培养48h加减2h！清场！