用pcDNA3.1(+)作为表达载体，设计PCR引物时怎么能保正不移码？起始密码子前的碱基个数应该是多少？
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楼主是要以cDNA为模板设计引物吗？那样的话不用考虑移码的问题。因为cDNA序列在起始密码子之前的5‘端是不会出现另一个起始密码子的。
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不会移码的 只要PCR产物的起始密码子前面没有别的起始密码子了
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你都有起始密码子了就不怕移码了，除非你是融合基因才需要仔细考虑融合的地方会不会移码
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