Question

双酶切鉴定（或者测序）是否含有目的基因的时候，为何用pMD18-T载体？

过程主要是：
从小麦胚胚芽鞘中提出总的RNA，反转录cDNA，然后纯化cDNA，特异性PCR扩增，电泳，得到目的基因，然后连接载体pMD18-T上，再进行双酶切鉴定（或者测序）
希望解释清楚点，我知道pMD18-T载体是克隆载体，但是不知道与我的问题有没有关。

Answer 1

通常先分析一下目的基因上存在哪些常见的酶切位点,
再选择合适的克隆载体.保证你双酶切的位点在目的基因上不会出现.
PMD18-T克隆位点两侧的酶切位点比较多,很常用的.

Answer 2

因为你用TAQ酶进行PCR的话会在片段末尾加A 而这个载体可以直接连接末尾有A的片段 不需要酶切后连接 所以方便 明白了不