菌落PCR的操作步骤及仪器有哪些?

rosarabbit
2012-09-19 · TA获得超过1711个赞
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1.取15-20ul Tris-HCl 放到编好号的0.5ml 的ep管中
2.用灭菌牙签,或枪头,沾取少量菌体(多了效果不好)
3.并将枪头或牙签在刚取出来的Tris-HCl中涮一下,可以看到溶液略微变浑浊
4.盖上管盖,100C煮沸5-10min
5.离心,取1-2ul上清配制PCR反应体系。如果菌体较多,则取0.5ul就够了
6.设置PCR仪程序,进行反应
7.结果电泳检测即可
GRS塑料
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jyyaohappy
2012-10-01 · TA获得超过235个赞
知道小有建树答主
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菌落PCR要菌长的足够大,一半摇菌保存,另一半做PCR
菌斑一般用灭菌的枪头在超净台挑取即可,在LB(摇菌用)和PCR反应液里蘸一下即可。
反应液按正常反应体系加就可以,全程在冰上操作,加完后稍离心,然后设置好PCR仪的反应程序,进行反应。结果跑一下电泳即可。
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阿扁床单
2012-10-01 · TA获得超过228个赞
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1.配置PCR反应体系,分装于八连管中
2.在超净台里用灭菌牙签占取少量菌体,将牙签放在八连管液体中涮一下
3.设置PCR仪,进行反应
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