Question

菌落pcr和菌液pcr在原理和操作方面有什么区别

Answer 1

菌落pcr和菌液pcr在原理和操作方面有什么区别
如果转化成功的话，菌落里的菌就含有你克隆的质粒载体了，用枪头直接碰一下，然后作为PCR模板，就可以进行PCR扩增了。但是菌落PCR鉴定的假阳性率其实也不低，所以建议你挑取菌落扩培之后抽提质粒，进行酶切鉴定，这样比较准确，酶切鉴定确认好之后再去测序以确定没有碱基突变或缺失。
你说的T7通用引物是指载体上的T7 promtor引物吗？那只是一条引物啊，如果加上GBH下游引物的话，扩增出来的就是你连接进去的目的基因的长度了。