请问若因为非特异扩增导致PCR产物弥散,理论上弥散带里是否应该包含目的条带?谢谢TT-TT
PCR产物电泳弥散,因为退火温度为55,所以初步考虑是退火过低导致的非特异扩增。但小女子有一疑问,我的目的产物是1000+bp,可smear却在250-500左右,所以想...
PCR产物电泳弥散,因为退火温度为55,所以初步考虑是退火过低导致的非特异扩增。但小女子有一疑问,我的目的产物是1000+bp,可smear却在250-500左右,所以想请问一下,理论上来说smear是不是应该包含了目的条带?如果不包含,是否足以说明样品为阴性?拜谢
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提高退火温度再做吧,非特异性扩增的smear在哪都有可能。严格的说,要确定是扩增的是否是目的条带需要将产物测序的。所以不能说明样品阴性。
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