Question

细胞污染用什么培养基摇菌

Answer 1

细胞污染永恒定律：无论什么细胞只要是不重要的细胞污染了，立刻加84弃之，重新复苏新冻存管培养；实在需要挽救的请参考以下：

细菌污染：主要有洋葱霍尔伯德菌型污染

确定是非常珍贵的细胞 建议分别配置含10倍庆大霉素和两性霉素溶液（G/A)的PBS和5倍庆大霉素和两性霉素溶液（G/A)的完全培养基各一份。然后先用10倍双抗的PBS洗涤细胞5-10次， 然后用5倍双抗的完全培养洗涤细胞3次以上,再加上含双倍的G/A溶液放培养箱培养，一个小时后换液，持续4个小时后，再加上正常培养细胞所需的抗生素，过夜，到最终确定细胞没有任何污染物，因此时细胞受损过大，建议优化培养基方式（血清提高2%-5%）或者立即冻存细胞，一个月后复苏。

真菌污染：

污染的多是曲霉菌，白色念珠菌，酵母菌，黑霉菌，孢子菌，真菌主要以预防为主，防治为辅，已经污染了，建议采用以下方法：

1. 细胞一旦污染，很难挽救，即使使用制霉菌素或放线菌素D，也是伤敌八千自损一万的办法，可使用抗生素进行查杀，但是高浓度的抗霉菌素对细胞有毒性作用。

2. 把所有细胞从污染的CO2孵箱转移，采用过氧乙酸擦洗孵箱(全部，尤其四个角)。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后，再移入细胞；

3. 用0.5%新洁尔灭擦拭超净台和墙壁，确保不留死角，地面用新洁尔灭消毒液拖地。

4. 将环境彻底消毒，整个培养间高锰酸钾或者乳酸熏蒸,孵箱内部包括托盘等全部用苯酚搽洗,封闭2天。

真菌污染预防方法：

1)，将细胞移出来，用微量硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里加适量硫酸铜或者酸氢二钠高盐液体防止霉菌

2)孵箱应定期清洁，大约一个月左右清洁一次，

3)可在培养基里加两性霉素或制霉菌素)或[放线菌素D或双抗进行预防。

4)最主要的还是要培养良好的无菌观念，实验室尽量不要大声说话，佩戴好口罩，手套，操作时应小心，避免培养基撒入培养箱以及生物安全柜，这些撒入培养箱的培养基为细菌及真菌的繁殖提供了很好的条件。

Answer 2

细胞污染培养基摇菌可用，细胞是生物体基本的结构和功能单位，已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成，但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现，一般来说，细菌等绝大部分微生物以及原生动物由一个细胞组成，即单细胞生物，高等植物与高等动物则是多细胞生物。

Answer 3

01
MEM培养基
是一种添加了营养物的最低必需培养基，仅含有12种必需氨基酸、L-谷氨酰胺和8种维生素，含糖量为1g/L。MEM是一种最基础、最常用的细胞培养基，主要应用于贴壁细胞的培养，在添加血清后，可用于培养多种单层生长的细胞，如成纤维细胞。修改配方后的a-MEM则可广泛应用于各种哺乳动物悬浮和贴壁细胞培养。
02
DMEM培养基
氨基酸含量是MEM的两倍，维生素含量是MEM的4倍，以及硝酸铁、丙酮酸钠和一些补充氨基酸。此外，DMEM分为低糖型和高糖型，葡萄糖含量分别为1g/L和4.5g/L。（低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养；高糖更适合高密度悬浮细胞培养，也适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。）
03
IMDM培养基
用于淋巴细胞和杂交瘤细胞的生长。与DMEM相比，添加了HEPES和硒，硝酸钾取代了硝酸铁，并且含有更多的氨基酸、维生素和无机盐。
04
Ham 's F-12K培养基
用于支持原代细胞的生长和分化。F-12K增加了氨基酸、丙酮酸、生物素、钙、镁、腐胺和酚红的含量。
05
DMEM/F12培养基
DMEM和F12的1:1混合物，能够在低血清条件下支持多种哺乳动物细胞的培养，在此培养基中成功培养的细胞包括：MDCK、神经胶质细胞、成纤维细胞和人内皮细胞等。
06
McCoy’s 5A培养基
广泛用于多种原代细胞及细胞系的培养，如来源于骨髓、皮肤、脾脏、肾脏和肺等组织的哺乳动物原代细胞。
07
RPMI-1640培养基
是在McCoy’5A的基础上进行改良研发出的，最初用于人白血病细胞的悬浮培养，后来发现也适用于HeLa、MCF-7、PC12、外周血单核细胞（B/T淋巴细胞）和星形细胞的培养。RPMI 1640与其它培养基的区别是含有还原型谷胱甘肽和高浓度维生素。此外还含有含有MEM、DMEM中不含的生物素、维生素B12和对氨基苯。
08
L15培养基
L-15培养基的配方中不含用于CO2平衡环境的碳酸盐缓冲系统, 而是用磷酸盐、L-精氨酸、L-组氨酸和 L-半胱氨酸作为缓冲剂。用半乳糖和丙酮酸钠代替葡萄糖以防止乳酸的形成。可以在无CO2培养箱中进行细胞培养，或者拧紧瓶盖培养。