Question

问几个高中生物问题

1.基因工程中，用钙离子处理大肠杆菌为什么会增大细胞壁的通透性？
2.动物细胞培养中，为什么用胰蛋白酶处理动物细胞？（酶分解细胞哪个结构？）
3.获得目的基因的方法是不是只有基因文库和人工合成？
4.在植物组织培养中为什么细胞分裂素和生长素的浓度比较高时会诱导愈伤组织分化出芽？
5.植物细胞融合中可能会同种植物原生质体融合，是否需要用选择培养皿进行筛选？？

如果哪个问题表达不清楚请告知，谢谢。

Answer 1

首先用氯化钙处理并没有使其细胞壁的通透性增强，氯化钙只影响DNA的附着，而并不影响DNA进入细胞。这个过程的机理目前还不清楚可能是氯化钙引起了细胞壁的某些变化从而提高了DNA的附着效率。

胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在pH为8.0、温度为37℃时，胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2 、Mg2 和血清、蛋白质克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2 、Mg2 的BSS，如：D-Hanks液。终止消化时，可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。

获取目的基因的方法，按照新人教选修三的教材，似乎可以分为三种：
1、从基因文库中获取；2、PCR扩增；3、化学方法人工合成。

生长素在植物组织培养中的主要作用是促进细胞生长与分裂，用于诱导愈伤组织形成、根的分化以及细胞的分裂和生长。
细胞分裂素在植物组织培养中的主要作用是促进细胞的分裂与分化，诱导配装提和不定芽的形成。
组培中大多数情况下两者都会同时使用，通过调节两者的浓度和比例来实现理想的生长与繁殖效果。
如果单纯从分裂与分化的角度来讲，生长素促进分裂、细胞分裂素促进分化。

是的

追问

第一个问题有教材称是改变了细胞壁的通透性。
第二个问题为什么细胞间会有蛋白质存在？糖蛋白么？
第三个问题PCR是扩增我问的是得到目的基因不是得到大量目的基因，这样PCR也算么？
第五个问题用什么选择培养皿？在动物细胞融合中用来HAT培养皿，如果说植物也需要选择培养皿那么原理是什么？？
问题有点多，谢谢。

Answer 2

只回答两个问题：
1、用钙离子处理大肠杆菌，会使细胞膜通透性发生变化，原因是Ga离子会使磷脂双分子层形成液晶结构，且在一定温度下（约42℃）晶体结构发生抖动形成孔隙。
2、动物细胞之间由蛋白质结构的连丝连接，胰蛋白酶处理的是这些连丝，而不是细胞结构。如果处理时间长了，会对细胞膜上的蛋白质造成创伤，所以要控制时间。