碱裂解法原理
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碱裂解法是提取质粒的最常用也最有效的方法，是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异达到分离目的。
原理:高pH使质粒DNA和染色体DNA变性，同时沉淀蛋白质。再将pH值调至中性，质粒DNA较小，很容易复性成双链。而染色体DNA较大，不会复性，缠结成网状不溶物质，从而可以通过离心除去。
方法:依次加入下面三种溶液:
溶液1:
葡萄糖
50
mmol/L，EDTA
100
mmol/L，Tris-Cl
25
mmol/L,溶菌酶5mg/ml,pH
8.0
溶液2:
NaOH
0.2
mol/L，SDS
1%
溶液3:
5
mol/L
KAc
60
ml，冰乙酸
11.5
ml，重蒸水
28.5
ml
其中溶液1作用主要是悬浮菌体，溶液2作用是裂解菌体，释放胞内物质，溶液3是沉淀染色体DNA
原理:高pH使质粒DNA和染色体DNA变性，同时沉淀蛋白质。再将pH值调至中性，质粒DNA较小，很容易复性成双链。而染色体DNA较大，不会复性，缠结成网状不溶物质，从而可以通过离心除去。
方法:依次加入下面三种溶液:
溶液1:
葡萄糖
50
mmol/L，EDTA
100
mmol/L，Tris-Cl
25
mmol/L,溶菌酶5mg/ml,pH
8.0
溶液2:
NaOH
0.2
mol/L，SDS
1%
溶液3:
5
mol/L
KAc
60
ml，冰乙酸
11.5
ml，重蒸水
28.5
ml
其中溶液1作用主要是悬浮菌体，溶液2作用是裂解菌体，释放胞内物质，溶液3是沉淀染色体DNA
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琦轩化工
2024-10-28 广告
在硼氢化钠还原反应中，溶剂的选择至关重要。常用的溶剂包括四氢呋喃、甲醇、乙醇等。四氢呋喃因其良好的溶解性和对硼氢化钠的稳定性而被广泛应用。甲醇也常用，但需注意其可能导致硼氢化钠的分解，需控制反应条件。乙醇虽然溶解度稍逊，但在某些特定情况下也...
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