鉴别蛋白质的方法有哪些
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常见的蛋白质鉴定方法有:
一、最简单的方法就是对所要鉴定的物体进行灼烧
二、使用化学药剂进行化学反应来鉴定蛋白质
三、较为精准的方法是使用仪器进行蛋白质鉴定,如质谱仪等
在生物学研究中经常会遇到一些关于蛋白质鉴定的问题,如单一蛋白质或者简单混合物的鉴定;对单一蛋白质的序列分析等。这一类蛋白质鉴定,在精密度上要求较高,所以几乎都是采用质谱仪器,来对蛋白质进行精密鉴定。
质谱技术是鉴定蛋白质的其中一种平台技术。可用到的质谱仪有Thermo Fisher的Q Exactive质谱仪,LTQ Orbitrap Velos质谱仪,以及AB SCIEX的6500 Q TRAP质谱仪。所在鉴定机构的不同,在硬件品牌的使用上也会有不同。
蛋白质鉴定的流程一般分三大步:蛋白质提取、纯化、鉴定。这个流程是一个将蛋白质层层“解剖”的过程,从中我们可以对蛋白分子量进行测定,蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质进行鉴定,非变性质谱分析以及Pull-down靶蛋白质谱鉴定等,较为细致的去分析蛋白质中的各种物质、性质等。
一、最简单的方法就是对所要鉴定的物体进行灼烧
二、使用化学药剂进行化学反应来鉴定蛋白质
三、较为精准的方法是使用仪器进行蛋白质鉴定,如质谱仪等
在生物学研究中经常会遇到一些关于蛋白质鉴定的问题,如单一蛋白质或者简单混合物的鉴定;对单一蛋白质的序列分析等。这一类蛋白质鉴定,在精密度上要求较高,所以几乎都是采用质谱仪器,来对蛋白质进行精密鉴定。
质谱技术是鉴定蛋白质的其中一种平台技术。可用到的质谱仪有Thermo Fisher的Q Exactive质谱仪,LTQ Orbitrap Velos质谱仪,以及AB SCIEX的6500 Q TRAP质谱仪。所在鉴定机构的不同,在硬件品牌的使用上也会有不同。
蛋白质鉴定的流程一般分三大步:蛋白质提取、纯化、鉴定。这个流程是一个将蛋白质层层“解剖”的过程,从中我们可以对蛋白分子量进行测定,蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质进行鉴定,非变性质谱分析以及Pull-down靶蛋白质谱鉴定等,较为细致的去分析蛋白质中的各种物质、性质等。
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一般鉴别蛋白质的最简便方法分以下两种情况:
1.检验固体物质:最简便方法是火烧,闻其是否有烧焦羽毛的气味,有则含蛋白质,无则不含;
2.检验液体物质:最简便方法是加入适量食盐或身边易得的可溶性盐充分混合看其是否凝聚现象出现,有则含蛋白质,无则不含。
1.检验固体物质:最简便方法是火烧,闻其是否有烧焦羽毛的气味,有则含蛋白质,无则不含;
2.检验液体物质:最简便方法是加入适量食盐或身边易得的可溶性盐充分混合看其是否凝聚现象出现,有则含蛋白质,无则不含。
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1.灼烧产生烧焦羽毛的气味是蛋白质.
2.遇浓HNO3变性产生黄色不溶物是蛋白质.
3.磨浆过滤,取滤液,先加NaOH,再加入双缩脲试剂,出现紫色反应,就为蛋白质.
2.遇浓HNO3变性产生黄色不溶物是蛋白质.
3.磨浆过滤,取滤液,先加NaOH,再加入双缩脲试剂,出现紫色反应,就为蛋白质.
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