Question

什么是半定量 RT- PCR

Answer 1

半定量RT-PCR一般是在没有条件做 实时PCR 的情况下使用，用于测定体内目的基因的表达增加减少与否，即通过目的基因跑出来的电泳带与管家基因（如β-actin）的电泳带的相对含量比较，观测目的基因表达增减，另外还要做一个β-actin的内参照对照。
管家蛋白基因就是细胞内一些表达比较稳定的基因，如β-actin在各种细胞内的含量都稳定在10%左右。因此研究的目的基因的表达量与这些比较恒定含量的基因一比较，就可以观察到目的基因是否随着时间改变了~~~

Answer 2

望采纳，因此半定量pcr时需要设置对照组。
4.
保证反转录的效率。
5.
rt-pcr需要做几个重复孔，避免加样的误差。
6.
所用的内参是否合适。
3，有什么问题互相交流总结我所做的rt-pcr的经验，提高半定量rt-pcr的可靠性或重复性需要注意的几点.
提取rna前确保样品的正确保存，不能有降解。
2.
提高rna的过程中避免rna酶的污染引起rna部分降解.
提取的rna需要保证无基因组dna的污染，因为管家基因的表达量只是相对保守，但视不同的处理方式会有变化。
希望能帮到你：
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