Question

高中生物 基因工程题

科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—，据图回答：
根据图示分析，在构建基因表达载体过程中，应用限制酶1 切割质粒，用限制酶2 酶切割目的基因.

说目的基因用2切可以切断 右边不应该是↓GATC
CTAG↓么这样就切断了吗？
左边G↓GATCC
CCTAG↓G 不是这样吗？这样怎么能切断？

Answer 1

题目中所述无误 先看目的基因 用2切开后确实为
↓GATC 和 G↓GATCC
CTAG↓ CCTAG↓G
看切开后 目的基因左右所带的碱基 左GATCC 右
G CTAG
再看GeneII的开口处一边G 另一边GATCC
CCTAG G
你把插口对好 不正好插进去了吗 ？

Answer 2

这样就得到
左边GATCC-
G-的黏性末端，右边是-
CTAG-的黏性末端，中间是目的基因。因为所要的目的基因两边不能用限制酶1切割，而限制酶2可以切出上述黏性末端，并且限制酶1切割质粒得到的黏性末端(GATCC-
G-)能以上述黏性末端重组，得到基因表达载体。达到实验目的。不懂可以追问。

Answer 3

能切GATC的限制酶肯定能切G GATC，而能切G GATC的酶不一定能切GATC，它取决于旁边的基因，题目的意图是为了在插入目的基因的情况下不破坏筛选基因，可以使检测筛选这一步骤得以完成，不懂可以追问

Answer 4

左边GGATCC
CCTAGG 中也含有GATC
CTAG序列